ПЦР — что это простыми словами?

Путем поэтапного исследования ПЦР-метод, являющийся по своей сути сложной химико-биологической цепной реакцией, позволяет определить в тканях организма вирусы, бактерии и грибки. Вирусы попадают в организм человека через слизистые оболочки – нос, рот, глаза. Они прилипают своими шипами к клеточным мембранам и там фиксируются. В крови и лимфе вируса нет, поэтому анализ крови не является показательным (исключением будет только продолжительная болезнь, когда на вирусную атаку вырабатывается иммунный ответ организма).

Когда человек только заразился, симптоматика его заболевания может не проявляться вообще либо будет выражена клинически неявно. Но вирус уже действует, активно размножаясь в носоглотке, в тканях слизистых и слюне. Носители вируса могут и не подозревать о его наличии, и определить, заразен ли человек, может только анализ ПЦР. Для этого из ротоглотки и носоглотки берут мазок при помощи зонда со стерильной щеточкой или тампоном, проводя несколько раз по слизистым пациента. Далее биоматериал запаковывают и передают для исследования в лабораторию.

ПЦР-диагностику используют в гинекологии и урологии при диагностике урогенитальных инфекций, передающихся половым путем. Этим методом диагностируют вирусные инфекции, такие как гепатиты, ВИЧ, коронавирус COVID-19 и пр. ПЦР-анализ позволяет выявлять скрытые и труднодиагностируемые инфекции, а также определять присутствие всего нескольких молекул ДНК возбудителя.

Таким образом, ПЦР-метод незаменим при выявлении хламидиоза, уреаплазмоза, гонореи, герпеса, гарднереллёза, микоплазменной инфекции, вирусов папилломы человека; при диагностике вирусных и бактериальных пневмоний, туберкулёза, хеликобактериоза, сальмонеллёза, дифтерии, онковирусов; при установлении отцовства.

Любой живой организм содержит генетическую информацию, за которую отвечает ДНК — дезоксирибонуклеиновая кислота. У каждого организма (будь это вирус, бактерия или грибок) она своя, и для ее выявления достаточно иметь лишь небольшой участок хранилища генетической информации. Некоторые микроорганизмы, такие как вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), хранят генетическую информацию в другой нуклеиновой кислоте – РНК, и её фрагменты также можно находить с помощью ПЦР, который работает на обнаружение этого небольшого, но уникального для каждого отдельного организма участка.

Для проведения анализа применяется специальный прибор – амплификатор. В него помещают частицу вируса, содержащую РНК или ДНК. Они достаточно маленькие, определить их и понять, есть ли в теле человека вредоносные микроорганизмы, трудно. Машина, в которую кладут частичку вируса, его не распознает, поэтому добавляются специальные компоненты, праймеры (короткий фрагмент ДНК), которые позволяют сделать большое количество этих цепочек РНК, чтобы машина начала их «видеть». Если есть хоть малейшая РНК вируса, например, коронавируса, то это позволяет размножить копии инфекции, чтобы определить, есть она в организме или нет. Метод предоставляет результат 100-процентной точности.

Чтобы выявить COVID-19, используют отдельный праймер, в котором находится большое число нуклеотидов для построения будущей РНК. Как только копий становится много, сразу начинается считывание информации.

Работа с ПЦР-тестом строится на принципе комплементарности, то есть связывание между цепочками происходит благодаря азотистым основаниям — тимину, аденину, цитозину и гуанину, причем «стыковаться» между собой они могут только так: аденин – с тимином, гуанин – с цитозином, и тогда точно обнаруживается «свой» фрагмент ДНК и запускается реакция создания огромного количества его копий. Цикл ПЦР проходит около трех минут. В это время количество копий растёт в геометрической прогрессии. Таким образом, за несколько часов (35-40 циклов) количество фрагментов увеличивается в несколько миллиардов, и тогда определить, какой возбудитель у данной конкретной инфекции, достаточно легко.

Таким образом, благодаря ПЦР появилась возможность точно диагностировать заболевание еще в инкубационном периоде, когда нет никаких клинических признаков болезни. Метод ПЦР позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько молекул ДНК возбудителя.

За час до взятия мазка из ротоглотки не чистить зубы, не полоскать рот/горло, не употреблять пищу, не пить, не жевать жевательную резинку, не курить.

В день взятия мазка из носа/носоглотки не использовать капли и спреи в нос, не промывать его.

Так как исследование выполняется не анонимно, необходимо приготовить к предъявлению медицинскому работнику паспорт.